रिकॉम्बिनेंट्स के चयन के लिए,एंटीबायोटिक मार्कर के इंसर्शनल इनएक्टिवेशन (निवेशित निष्क्रियकरण) को अब क्रोमोजेनिक सबस्ट्रेट के लिए कोडिंग करने वाले मार्कर जीन के इंसर्शनल इनएक्टिवेशन द्वारा प्रतिस्थापित कर दिया गया है। कारण बताइए।

(D) एंटीबायोटिक्स के निष्क्रियकरण द्वारा रिकॉम्बिनेंट्स का चयन एक श्रमसाध्य प्रक्रिया है क्योंकि इसके लिए निम्नलिखित की आवश्यकता होती है: $(i)$ दो एंटीबायोटिक (एम्पिसिलिन और टेट्रासाइक्लिन) प्रतिरोध मार्करों वाला एक वेक्टर।
$(ii)$ दो प्रकार की मीडिया प्लेटें तैयार करना,जिनमें से प्रत्येक में एक एंटीबायोटिक हो।
रूपांतरित कोशिकाओं को पहले उस एंटीबायोटिक प्लेट पर रखा जाता है जो इंसर्शनल रूप से निष्क्रिय नहीं हुई है (जैसे,एम्पिसिलिन) और ट्रांसफॉर्मेंट्स के विकास के लिए रात भर इनक्यूबेट किया जाता है। रिकॉम्बिनेंट्स के चयन के लिए,इन ट्रांसफॉर्मेंट्स को दूसरी एंटीबायोटिक (टेट्रासाइक्लिन) प्लेट पर रेप्लिका प्लेटिंग किया जाता है,जो विदेशी जीन के प्रवेश के कारण निष्क्रिय हो गई है। नॉन-रिकॉम्बिनेंट्स दोनों प्लेटों पर उगते हैं,जबकि रिकॉम्बिनेंट्स केवल एम्पिसिलिन प्लेट पर उगते हैं।
यह पूरी प्रक्रिया श्रमसाध्य और समय लेने वाली है,जिसमें दो रातों के इनक्यूबेशन की आवश्यकता होती है। हालाँकि,यदि हम एक ऐसे मार्कर जीन का उपयोग करते हैं जो क्रोमोजेनिक सबस्ट्रेट की उपस्थिति में रंग उत्पन्न करता है (जैसे,$\beta$-गैलेक्टोसिडेज़),तो हम एक ही मीडिया प्लेट पर (जिसमें एक एंटीबायोटिक और क्रोमोजेनिक यौगिक हो) एक रात के इनक्यूबेशन के बाद रिकॉम्बिनेंट्स और नॉन-रिकॉम्बिनेंट्स के बीच अंतर कर सकते हैं। इसलिए,क्रोमोजेनिक मार्कर का उपयोग अधिक कुशल है।